1.保證透射電鏡各部分的對中。
所謂對中的標(biāo)準(zhǔn)就是要做到:(一)當(dāng)放大倍數(shù)改變時,視場的中心不會丟失;(
二)當(dāng)改變物樣上的照明條件時,照明束不會失去均勻性或偏離中心;(三)對圖像進
行調(diào)焦時,它不致偏離中J心;(四)當(dāng)功能開關(guān)從一種模式轉(zhuǎn)換到另一種模式時,生
物顯微鏡和體視顯微鏡的使用物樣上的照明情況不受影響。要保證以上各點,首先
電鏡本身的設(shè)計制造當(dāng)然應(yīng)該是精良的。
電鏡的對中包括:*,電子槍、聚光鏡以及中間鏡、投影鏡等相對于物鏡的
對中。因為一臺電鏡出廠時已保證物鏡光軸與電鏡的機械軸*重合,所以可把物
鏡作為對中時的參考標(biāo)準(zhǔn)。第二,電鏡各級配備的電子束偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)要對中合軸。第
三,各級可動光闌(包括聚光鏡、物鏡、中間鏡的光闌)也要對中。誠然,生物顯微
鏡和體視顯微鏡的使用一般情況下各實驗室都有專門技術(shù)人員負責(zé)對電鏡的基本調(diào)
整,以提供必要的工作條件.但是在使用過程中,有些對中情況不可避免地會遭到
破壞或改變,因此研究人員必須能及時發(fā)現(xiàn)問題,
2.特別重視各級透鏡尤其是物鏡的消像散.
用低放大倍數(shù)檢查射到熒光屏的光斑時,如發(fā)現(xiàn)光斑偏離圓形。這說明存在聚
光鏡的像散.在高放大倍數(shù)時它會導(dǎo)致zui大亮度的損失,并形成不對稱的照明孔徑
角而影響成像質(zhì)量因此在調(diào)對中的同時,應(yīng)該對聚光鏡消像散.
用低放大倍數(shù)檢查射到熒光屏的光斑時,如發(fā)現(xiàn)光斑偏離圓形。這說明存在聚
光鏡的像散.在高放大倍數(shù)時它會導(dǎo)致zui大亮度的損失,生物和體視顯微鏡
的使用并形成不對稱的照明孔徑角而影響成像質(zhì)童。因此在調(diào)對中的同時,應(yīng)該對
聚光鏡消像散.
物鏡的消像散更為重要。由于像散的存在,不僅不能得到清晰的圖
像,而且在高放大倍數(shù)的圖像中往往會出現(xiàn)一些細節(jié)假象。消像散的有效方法是在
樣品支持膜上找到一個小孔,先將物鏡調(diào)于小量過焦?fàn)顟B(tài),生物顯微鏡和體視顯微
鏡的使用再調(diào)節(jié)消像散器使膜孔周圍出現(xiàn)的黑邊達到處處寬度均勻。zui后再將物鏡
調(diào)回至正聚焦.從事高分辨工作的科技工作者必須自己學(xué)會消像散。
3。學(xué)會正確選擇各項工作參盈和工作模式.
電鏡中有許多參t是可供選擇的,例如電子槍的加速電壓、聚光鏡
決定的基本束斑尺度、各級透鏡的可動光闌孔徑等.電鏡工作者可根據(jù)實驗樣品的
厚度、使用化學(xué)組成、原始襯度特性以及耐幅照程度等自由選用上述各物理量。
電鏡本身還可用于不同工作模式,如常規(guī)成像、低倍查樣、選區(qū)成像、選區(qū)衍
射及高分辨衍射等。如果加上X射線能譜儀、使用電子能量損失譜儀、掃描顯示單元等附件,則它的工作模式將更多。
4.認真對待圖像記錄工作,力求能有高質(zhì)量的圖片到手。
可以說電鏡工作的成果幾乎全部體現(xiàn)在所獲得的圖片上.因此在保證價
格*工作條件的前提下,電鏡工作者要十分重視圖像的拍攝,包括調(diào)焦、選擇放
大倍數(shù)、調(diào)節(jié)襯度和曝光量等,還要防止照相過程中可能遇到的機械振動和樣品漂
移等。