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(1)熒光顯微鏡一般分為透射和落射式兩種類型:
a.透射式:激發(fā)光來自被檢物體的下方,聚光鏡為暗視野聚光鏡,使激發(fā)光不進(jìn)入物鏡,而使熒光進(jìn)入物鏡。它在低倍情況下明亮,而高倍則暗,在油浸和調(diào)中時(shí),較難操作,尤以低倍的照明范圍難于確定,但能得到很暗的視野背景。透射式不使用于非透明的被檢物體。
b.落射式:透射式目前幾乎被淘汰,新型的熒光顯微鏡多為落射式,光源來自被檢物體的上方,在光路中具有分光鏡,所以對透明和不透明的被檢物體都適用。由于物鏡起了聚光鏡的作用,不僅便于操作,而且從低倍到高倍,可以實(shí)現(xiàn)整個(gè)視場的均勻照明。
(2)熒光鏡檢術(shù)的注意事項(xiàng):
a.激發(fā)光長時(shí)間的照射,會發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象,因此盡可能縮短觀察時(shí)間,暫時(shí)不觀察時(shí),應(yīng)用擋板遮蓋激發(fā)光。
b.作油鏡觀察時(shí),應(yīng)用"無熒光油"。
c.熒光幾乎都較弱,應(yīng)在較暗的室內(nèi)進(jìn)行。
d.電源裝穩(wěn)壓器,否則電壓不穩(wěn)不僅會降低汞燈的壽命,也會影響鏡檢的效果。
目前許多新興生物研究領(lǐng)域應(yīng)用到熒光顯微鏡,如基因原位雜交(fish)等等。